نقش دمین wd-40 پروتئین apaf-1 در اتصال به سیتوکروم c

پایان نامه
چکیده

آپوپتوز یا مرگ برنامه ریزی شده سلول یک نوع از مرگ سلولی می باشد که موجودات چند سلولی جهت حذف سلول های نا مناسب از آن استفاده می نمایند. نکته مهم در خلال حذف این نوع سلول ها این است که فرایند آپوپتوز به حدی کنترل شده و ایمن باشد که به ساختارهای مجاور هیچ نوع آسیبی وارد نشود. در این مطالعه با استفاده از دیدگاه protein complementation assay و تکنولوژی گزارشگر های دو بخشی لوسیفراز نقش دمین wd-40 از پروتئین apaf-1 بررسی شد. در این روش با استفاده از دو سازه که یکی حاوی قطعه آمین آنزیم لوسیفراز ( اسید آمینه های 1-416) متصل شده به سمت آمین مولکول apaf1 و دیگری حاوی قطعه کربوکسی آنزیم لوسیفراز (اسید آمینه های 395-550 ) متصل شده به سمت آمین apaf1 بود، نقش دمین wd-40 مورد بررسی قرار گرفت.برای این بررسی دمین wd-40 با یک جهش نقطه ایی و تبدیل رمز یک آمینواسید به رمز پایان از پروتئین apaf-1 حذف شد.سلول های ترانسفکت شده با این دو سازه نوترکیب تحت القاء آپوپتوز با داروی doxorubicin در غلظت 1 میکرو مولار قرار گرفتند. آنالیز های انجام شده جهت سنجش فعالیت لوسیفراز افزایش 650 برابری را 17 ساعت پس از القاء آپوپتوز نشان می داد و با وجو این افزایش فعالیت کاسپازها تقریبا بدون تغییر ماند. مقایسه نتایج حاصل از این بررسی با نتایج حاصل از کارهای گذشته نشان داد حذف دمین wd-40 سبب حساسیت بسیار بیشتر پروتئن apaf-1 به داروهای ضد سرطان و تشکیل کمپلکس آپاپتوزوم می شود، درضمن این کمپلکس توانایی فعال کردن کاسپازهای سلول را دارد.

منابع مشابه

بررسی اثر یک مشتق از پروتئین Apaf-1 بر فعالیت کاسپاز سلول‎های HEK293T

مقدمه: مرگ برنامه‌ریزی شده سلول یا همان آپوپتوز یکی از مهمترین فرآیندهای فیزیولوژیکی در تکوین و حفظ هموستازی موجودات چندسلولی می‌باشد. هر گونه اختلالی در تنظیم آپوپتوز منجر به ایجاد اختلالات گسترده ژنتیکی، بیماریهای خود ایمنی و سرطان می‌شود. فرآیند آپوپتوز هم در بحث سلامت و هم در بیماریها ضروری می‌باشد. اصطلاح آپوپتوز به تغییرات مورفولوژیکی یک سلول که درگیر مرگ برنامه‌ریزی شده باشد اطلاق می‌گر...

متن کامل

APAF 1 ( Apoptotic protease activating factor 1 )

Five isoforms of APAF1 cDNA have been identified in Homo sapiens: The original APAF1 (also called Apaf-1S) is 3585 bp long (it contains 12 WD40 repeats); The APAF1-1M isoform (3618 bp) contains an insertion of 33 nt after position 295 of the first published sequence (11 aa insertion GKDSVSGITSY between aa 98 and 99; it also contains 12 WD40 repeats); The APAF1XS isoform (3516 bp) contains the s...

متن کامل

بررسی میزان بیان ژن‌های Fas و Apaf-1 در فیبروبلاست‌های پوست بیماران مبتلا به اﺳﮑﻠﺮوز ﺳﯿﺴﺘﻤﯿﮏ

Background: Systemic sclerosis (SSc) is an autoimmune rheumatic connective tissue disease. In normal wound healing process, fibroblasts are activated, proliferated and involved in tissue repair, and then removed by apoptosis. In systemic sclerosis, patient’s fibrosis occurs when fibroblasts become resistant to apoptosis and secrete a large amount of collagen and other extracellular matrixes. As...

متن کامل

A comparison of the expression and properties of Apaf-1 and Apaf-1L.

Apaf-1 is a mammalian homolog of CED-4 that regulates cell death by participating in a ternary complex with cytochrome c, and procaspase-9. In the case of CED-4, two splice variants exist. The smaller (CED-4S) is proapoptotic while the larger (CED-4L) contains a short in-frame insert and is anti-apoptotic. We cloned a murine variant of apaf-1, termed apaf-1L, which contains an eleven amino acid...

متن کامل

نقش پروتئین واکنشی C در تشخیص عفونت زودرس نوزادی

چکیده زمینه: عفونت باکتریایی هنوز به عنوان یکی از شایع ترین چالش های تشخیصی و درمانی در طب نوزادان باقی مانده و یک علت مهم مرگ و میر نوزادی است. هدف: مطالعه به منظور تعیین نقش پروتئین واکنشی C (CRP) در تشخیص عفونت زودرس نوزادی انجام شد. مواد و روش ها: این مطالعه مقطعی بر روی 100 نوزاد 1 تا 7 روزه مشکوک به سپسیس زودرس نوزادی بستری شده در بخش مراقبت های ویژه نوزادان بیمارستان شهید صدوقی یزد انجا...

متن کامل

Rsk-mediated phosphorylation and 14-3-3ɛ binding of Apaf-1 suppresses cytochrome c-induced apoptosis.

Many pro-apoptotic signals trigger mitochondrial cytochrome c release, leading to caspase activation and ultimate cellular breakdown. Cell survival pathways, including the mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascade, promote cell viability by impeding mitochondrial cytochrome c release and by inhibiting subsequent caspase activation. Here, we describe a mechanism for the inhibition of cytoc...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پایه

کلمات کلیدی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023